绿原酸药理研究进展

    绿原酸(chlorogenic acid，CGA)，又名咖啡鞣酸，是由咖啡酸(eafeic acid)与奎尼酸(quinic acid)形成的缩酸，属于苯丙素类化合物。CGA广泛存在于植物中，以金银花、杜仲中的含量较高，具有广泛的药理作用。

1 药动学
      吸收：人体研究表明，CGA口服吸收差，只有少部分在小肠以原型吸收，大部分则进入结肠经微生物代谢为安息香酸、苯丙酸及肉桂酸等物质后被吸收。因此口服CGA后，在血浆中主要以代谢产物的形式存在。抗生素可以影响结肠正常菌群，进而影响CGA及其肠道代谢产物在血浆中的浓度。蛋白结合：体外试验发现CGA可与人血清白蛋白(HAS)结合 J，但不同浓度时结合方式有所不同：在低浓度时，只有一个结合位点，一分子HAS结合一分子CGA；高浓度时，存在多个结合位点。结合的主要部位在HAS的IIA区域。CGA在体内的血浆蛋白结合率仍不清楚。代谢：CGA在体内的代谢尚未完全阐明。Olthof等的研究发现CGA被吸收后可代谢为3、4．二羟基肉桂酸，3、4一二羟基安息香酸，3一甲氧基．4．羟基安息香酸等物质，结肠中的代谢产物进入血浆后，可进一步转化为马尿酸。P450酶可能参与了这一过程。排泄：血浆中CGA及其代谢产物主要通过肾脏排泄。口服给药，则主要以代谢产物的形式随尿排出，其中马尿酸所占的比例最高，约占CGA及其代谢产物总量的一半。静脉给药后，CGA在大鼠体内呈二室模型分布，生物半衰期tl／2约为O．2O h。

2 药效学
2．1 心血管保护作用
     CGA作为一种自由基清除剂及抗氧化剂已被大量的试验证明ll J。CGA的这种生物活性，对心血管系统能产生保护作用。已知氧自由基，OX-LDL等是引起内皮损伤的重要有害因子之一，而血管内皮细胞损伤是引起诸如血小板聚集、凝血、血管平滑肌细胞凋亡与增殖、血管张力调节紊乱等病理状态的基础。常翠青等证明CGA对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人内皮细胞损伤具有预防性保护作用。Chlopcikova等的研究发现CGA能保护心肌细胞免受多柔比星(Doxombiein，DOx)引起的氧化应急损伤，且显著抑制铁离子依赖性DOX诱导的心肌细胞内微粒体及线粒体膜的脂质过氧化，其半数抑制浓度(IC5o)分别为8．04±0．74和6．87±0．52。可见CGA通过清除自由基及抗脂质过氧化，可保护血管内皮细胞，进而在防治动脉粥样硬化、血栓栓塞性疾病及高血压病等方面发挥作用。

2．2 抗诱变及抗癌作用
     动物实验表明，CGA对胃癌及结肠癌的发生具有预防及抑制作用[10,11]。CGA抗诱变及抗癌作用机制可能与下列因素有关：促氧化作用：Jiang等研究发现CGA在碱性环境中为一促氧化剂，能导致肿瘤细胞产生较大的DNA碎片，并且引起核凝集。这种作用可能与过氧化氢氧化有关。增强芳烃羟化酶的活性：芳烃羟化酶是多芳香烃的重要代谢酶，其活性增高将提高组织细胞抗多芳香烃化合物的诱变作用，体外研究发现CGA能增强芳烃羟化酶的活性 。抑制8一羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)的形成：8-OH-dG是癌变和细胞氧化应激反应过程中的重要物质，它在哺乳动物细胞中能诱导点突变。CGA能抑制4一硝基喹啉一1。氧化物(4-nitroquinoline一1-oxide，4NQO)诱导的8-OH-dG的增高，但对内源性8-OH-dG的水平没有影响。抑制致癌物一DNA加合物【13,15]及氧自由基的形成也是其发挥抗癌作用的重要机制之一。2．3 抗菌及抗病毒作用CGA能抑制大肠埃希杆菌、宋内志贺菌(D组)、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、藤黄微球菌及军团菌的生长，其抗菌机制与非竞争性抑制细菌体内的芳基胺乙酰转移酶(NAT)有关[16-19]。胡克杰等研究了CGA的体外抗病毒作用，发现CGA能显著抑制合胞病毒、柯萨奇B组3型、腺病毒7型等，对腺病毒3型和柯萨奇B5型也有一定的抑制作用。Chiang等还发现CGA对腺病毒11型具有强大的抑制效应 。其抗病毒机制尚待阐明。

2．4 降脂作用
    静脉给予CGA能显著降低大鼠血浆中胆固醇和甘油三酯的含量，肝脏中的甘油三酯水平也有明显降低。在SD大鼠食物中同时加入CGA和咖啡酸，也发现大鼠肺、肝等组织中的Vit E和胆固醇含量均有所下降。

2．5 抗白血病作用
    Chiang等体外研究发现CGA具有较弱的抗白血病活性 J。Bandyopadhyay等研究证明CGA可抑制Ber-Abl和c-Abl酪胺酸激酶，并诱导Ber-Abl阳性细胞包括慢性粒细胞白血病病人体内Ber-Abl阳性的原始淋巴细胞的细胞凋亡。同时，还发现CGA对植入裸鼠体内的Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病细胞株K562具有破坏作用[蚓。

2．6 免疫调节作用
    体外研究显示CGA不仅可显著增强流感病毒抗原引起的T细胞增殖，并且能诱导人淋巴细胞及人外周血白细胞生成7-IFN及a-IFN[26-2s]。CGA亦能提高大鼠体内的I 、IgG1及IL广4水平l。在最近的研究中还发现CGA能够激活神经钙蛋白(eal-eineurin)从而增强巨噬细胞功能。

2．7 降糖作用
    Andrade-Cetto A和Wiedenfeld H 的研究证实，CGA在动物体内具有降糖作用，3 h内其降糖效应与格列本脲无统计学差异[31 J。其机制可能与抑制葡萄糖一6一磷酸位移酶和葡萄糖吸收有关。

2．8 其它
    CGA还可抑制葡萄球菌外毒素引起的细胞因子和趋化因子的生成，抑制增生性瘢痕来源成纤维细(hypertrophic scar-derived fibroblasts，mFs)引起的成纤维细胞胶原网架的收缩 J以及应激反应所致的促肾上腺皮质激素(ACm)升高。Ejzemberg等发现CGA还具有抗补体作用，且证明这种作用是通过经典途径而产生的[36J。此外，CGA可影响血浆中的微量元素的浓度。静脉注射CGA后，大鼠血浆中磷的含量明显降低，而铜、镁、钠和钾的含量却显著升高l2 。这提示在 3临床应用时，应注意防治电解质紊乱。

3 药物相互作用
    如前所述抗生素能影响CGA在胃肠道的吸收。另有报道，同时静脉给予双黄连与抗生素时，CGA(双黄连中的有效成分之一)与抗生素的排泄会减少，其机制可能与竞争排泄通道有关。CGA还可抑制铁离子及食物性非血红素铁的 6吸收，促进铝离子的吸收。体外研究表明，CGA能抑制大鼠肝脏中P4502B1的活性，影响其底物7．乙氧基4．三氟甲基．香豆素(7一ethoxy-4-trifluoromethyl coumarin)的代谢。推测CGA可能影响人体与之相对应的CYP 2B6的活性，进而影响其底物的代谢，但其临床意义有待进一步证实。

4 结语
    随着对CGA研究的逐渐深入，我们对CGA的 9认识也愈加全面，这为我们科学制药与合理用药提供了重要的理论依据。从目前对CGA药动学的研究来看，口服CGA的生物利用度较低，而且依赖于结肠微生物的活性。因此，要发挥CGA的药效最好血管内给药，而口服CGA所产生的效应可能是其代谢产物直接引起的。在药效学的上，新发现的CGA具有显著活性的药理 ．作用，可为新药开发提供新的思路。由于存在药物的相互作用，我们在临床联合用药时要引起注意，比如：老年性痴呆症的病人，当含铝离子的药物与 12CGA同时服用时，可能会因铝吸收增加而加重中枢神经损害；而缺铁性贫血的病人，口服补铁时与CGA合用则会降低疗效。CGA与抗生素相互作用 13的结果取决于CGA的给药方式，口服给药时，抗生素能降低CGA及其代谢产物的血药浓度，进而降低CGA的疗效；静脉给药时，可能会因为减少二者的排泄而增强疗效或增加不良反应。总之，绿原酸具有多种药理作用且分布广泛，加快对绿原酸的研究开发具有非常重要的意义。

绿原酸的结构

1、绿原酸的结构
        绿原酸（Chlorogenic acid，以下简称CA），分子式：C16H18O9，分子量：354.30，是由咖啡酸（Caffeic acid）与奎尼酸（Quinic acid，1-羟基六氢没食子酸）生成的缩酚酸，异名咖啡鞣酸，系统名1，3，4，5-四羟基环己烷羧酸-（3，4-二羟基肉桂酸酯），化学名3-O-咖啡酰奎尼酸（3-O-caffeoylquinic acid），是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。
绿原酸结构式：
      绿原酸由奎尼酸和咖啡酸缩合而成，根据咖啡酰在奎尼酸上的结合部位和数目不同，从理论上讲，单咖啡酰奎尼酸和二咖啡酰奎尼酸所组成的绿原酸异构体共有10种，分别为：1-咖啡酰奎尼酸、3-咖啡酰奎尼酸、4-咖啡酰奎尼酸、5-咖啡酰奎尼酸、1，3-二咖啡酰奎尼酸、1，5-二咖啡酰奎尼酸、1，6-二咖啡酰奎尼酸、3，4-二咖啡酰奎尼酸、3，5-二咖啡酰奎尼酸、4，5-二咖啡酰奎尼酸。但到目前为止，从植物中发现的绿原酸异构体有如下：绿原酸（3-咖啡酰奎尼酸）、隐绿原酸（Band510）（4-咖啡酰奎尼酸）、新绿原酸（5-咖啡酰奎尼酸）、异绿原酸A（4，5-二咖啡酰奎尼酸）、异绿原酸B（3，4-二咖啡酰奎尼酸）、异绿原酸C（3，5-二咖啡酰奎尼酸）、莱蓟素（1，3-二咖啡酰奎尼酸）。[1] 
2、绿原酸的理化性质
      绿原酸半水合物为白色或微黄色针状结晶，在110℃时变为无水物，与稀盐酸共热产生咖啡酸，熔点208℃，比旋光度[α]D=35 2°(C=28)。绿原酸在25℃时水中溶解度约为4%，易溶于乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂，微溶于乙酸乙酯，难溶于三氯甲烷、乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。绿原酸是由咖啡酸与奎尼酸形成的酯，其分子结构中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定部分。在从植物提取过程中，往往通过水解和分子内酯基迁移而发生异构化。由于绿原酸的特殊结构，决定了其可以利用乙醇、丙酮、甲醇等极性溶剂从植物中提取出来，但是由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热。绿原酸的供试液放置于棕色瓶、冰箱（2℃）保存时最为稳定。
3、绿原酸的分布
     绿原酸在植物中广泛分布，从高等双子叶植物到蕨类植物均有报道,但含量较高的植物不多，主要存在于杜仲科、忍冬科忍冬属Lonicera L.、菊科蒿属Artemisia L.植物中，包括杜仲、金银花、向日葵、继花、咖啡和可可树等。
4、绿原酸的药理作用
     绿原酸被认为是众多药材和中成药抗菌解毒、消炎利胆的主要有效成分，通常被作为定性甚至定量的指标。
    据报道，绿原酸的主要生物活性有（1）对透明质酸酶及葡萄糖-6-磷酸酶的抑制作用；（2）对自由基的清除及抗脂质过氧化作用；（3）抗诱变作用；（4）保肝利胆作用；（5）抗菌、抗病毒及解痉等作用。

绿原酸
别名：氯原酸,咖啡鞣酸
化学名：3 - 咖啡酰奎尼酸 Cyclohexanecarboxylic acid, 3-[[3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxy-2-propenyl]oxy]-1,4,5-trihydroxy-1, [1S-(1 α , 3 β , 4 α , 5 α )]
CAS NO: 327-97-9
分子式及分子量：C16H18O9=354.30
植物来源:主要存在于金银花、杜仲叶中.
蔷薇科植物英国山楂Crataegus oxyacantha Linn.的果实，千屈菜科植物千屈菜Lythrum salicaria L.花，无患子科植物坡柳Dodonaea viscose (L.)Jacp.，水龙骨科植物欧亚水龙骨Polypodium vulgare L.根茎，马鞭草科植物假败酱Stachytarpheta jamaicensis(L.)Vahl根，十字花科植物卷心菜Brassica oleracea L.var.capitata L.茎、叶，蓼科植物扁蓄Polygonum aviculare L.全草，茜草科植物篷子菜Galium verum L.全草，忍冬科植物蒴翟Sambucus javanica Reinw.全草.
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物理性状：半水合物为针状结晶（水）。110 ℃变为无水化合物，熔点 208 ℃， [ α ]24D-35.2 ℃（ c=2.8）。25 ℃水中溶解度为 4%，热水中溶解度更大；易溶于乙醇及丙酮，极微溶于醋酸乙酯。 13CNMR（H2O）A：126.6(C-1), 114.1(C-2), 144.2(C-3), 147.0(C-4), 116.0(C-5), 122.6(C-6), 145.9(C-7), 115.2(C-8), 168.9(C-9); B: 76.6(C-1), 38.3(C-2), 70.6(C-3), 72.8(C-4), 71.0(C-5), 37.3(C-6), 180.1(C-7)[1] 。

作用与用途：具有较广泛的抗菌作用，但在体内能被蛋白质灭活 [11] 。与咖啡酸相似，口服或腹腔注射时，可提高大鼠的中枢兴奋性。可增加大鼠及小鼠的小肠蠕动和大鼠子宫的张力。有利胆作用，能增进大鼠的胆汁分泌 [12-14] 。对人有致敏作用，吸入含有本品的植物尘埃后，可发生气喘、皮炎等，但食入后可经小肠分泌物作用，变为无致敏性物质 [15,16] 。有止血、增高白血球 [17] 。及抗病毒作用 [18] 。具有缩短血凝及出血时间的作用 [19] 。
毒性很小，幼大鼠口服的 LD50 大于 1g/kg ，腹腔注射大于 0.25g/kg[20] 。

(1) 降压作用：经多年临床试验证实的，杜仲绿原酸有明显的降压作用，而且疗效平稳，无毒、无副作用。美国威斯康星大学（Charles J Sih, et al . Separation and synthesis of pinoresinol diglucoside moides olive J Am Chem Soc 1976,98(17):5412等研究发现杜仲绿降血压的有效成分是松酯醇二葡萄糖苷，桃叶珊瑚甙，绿原酸，和杜仲绿原酸多糖类。

(2) 抗肿瘤作用：现代药理实验证明杜仲绿原酸有抗癌和抑癌之功效，日本学者研究了杜仲绿原酸的变异原性抑制作用(antimutagenicity)，发现该作用与绿原酸等抗变异原性成分有关，揭示了绿原酸对肿瘤预防的重要意义。

(3) 补肾、增强机体免疫作用：实验表明明杜仲绿原酸具有兴奋垂体－肾上腺皮质系统、增强肾上腺皮质功能的作用，说明杜仲绿原酸作为助阳补肾是有科学依据的。研究发现杜仲绿原酸既能启动单核巨噬细胞系统和腹腔巨噬细胞系统的吞噬活性，增强机体的非特异免疫功能，又能对迟发型超敏反应起抑制作用。

(4) 抗氧化、抗衰老、抗肌肉骨骼老化：杜仲绿原酸含有一种可促进人体的皮肤、骨骼、肌肉中胶蛋白的合成与分解的特殊成分，具有促进代谢、防止衰退的功能，可用来预防宇航员因太空失重而引起的骨骼和肌肉衰退，同时发现杜仲绿原酸无论在体内还是体外，均有明显抗自由基作用。

(5) 抗菌、抗病毒：杜仲绿原酸有较强的抗菌消炎作用，桃叶珊瑚苷及其多聚体有明显的抑菌作用，桃叶珊瑚苷元对革兰氏阴性、阳性菌都有抑制作用。桃叶珊瑚苷有抑菌、利尿作用，并能促进伤口愈合；桃叶珊瑚苷与葡萄糖苷一起预培养后还会产生明显的抗病毒作用，但其本身开不具有抗病毒功能。日本爱知医科大学加龄医科学研究所经研究确认，从杜仲中提取的碱性物质有抗破坏人体免疫系统病毒的功能，这种物质有可能用于预防和治疗艾滋病。

(6) 其它作用：利尿，利胆，降血脂，保胎

绿原酸化学名称：3 - 咖啡酰奎尼酸，分子式：C16H18O9分子量：354.30。绿原酸具有抗菌、消炎、解毒、利胆、降压和升高白细胞及显著增加胃肠蠕动和促进胃液分泌等药理作用，对大肠杆菌、金色葡萄球菌、肺炎球菌和病毒有较强的抑制作用；对急性咽喉炎症和皮肤病有明显疗效，临床上用于治疗急性细菌性感染疾病及放化疗时所致的白细胞减少症，对月经过多，子宫功能性出血有良好的止血效果
[来源] 为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thumb.、红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、山银花 Lonicera confusa DC.或毛花柱忍冬Lonicera dasytyla Rehd.的干燥花蕾或带初开的花。
[植物形态] 多年生半常绿木质藤本。茎中空，多分枝，老枝外表棕褐色，栓皮常呈条状剥离；幼枝绿色，密生短柔毛。叶对生，卵圆形至长卵圆形，长3～8cm,宽1.5～4cm,全缘，嫩叶两面有柔毛，老叶上面无毛。花成对腋生，苞片叶状，卵形，2枚，长达2cm；萼筒细长，上唇4浅裂，下唇不裂，稍反转；雄蕊5；雌蕊1，花柱棒状，与雄蕊同伸出花冠外，子房下位。桨果球形，黑色。花期5～7月，果期7～10月。
[药材性状] 呈棒状，上粗下细，略弯曲，长2～3cm，上部直径约3mm，下部直径约1.5mm。表面黄白色或绿白色，贮久色渐深，密被短柔毛。偶见叶状苞片。花萼绿色，先端5裂，裂片有毛，长约2mm。开放者花冠筒状，先端二唇形；雄蕊5个，附于筒壁，黄色；雄蕊1个，子房无毛。气清香，味淡、微苦。
[功能主治] 清热解毒，凉散风热。用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热血毒痢，风热感冒，温病发热。

杜仲绿原酸是杜仲叶中的主要功能性成分。杜仲绿原酸具有抗菌、消炎、解毒、利胆、降压和升高白细胞及显著增加胃肠蠕动和促进胃液分泌等药理作用，对大肠杆菌、金色葡萄球菌、肺炎球菌和病毒有较强的抑制作用；对急性咽喉炎症和皮肤病有明显疗效，临床上用于治疗急性细菌性感染疾病及放化疗时所致的白细胞减少症，对月经过多，子宫功能性出血有良好的止血效果杜仲绿原酸的主要药理作用有：
  (1) 降压作用：经多年临床试验证实的，杜仲绿原酸有明显的降压作用，而且疗效平稳，无毒、无副作用。美国威斯康星大学（Charles J Sih, et al . Separation and synthesis of pinoresinol diglucoside moides olive J Am Chem Soc 1976,98(17):5412等研究发现杜仲绿降血压的有效成分是松酯醇二葡萄糖苷，桃叶珊瑚甙，绿原酸，和杜仲绿原酸多糖类。
(2) 抗肿瘤作用：现代药理实验证明杜仲绿原酸有抗癌和抑癌之功效，日本学者研究了杜仲绿原酸的变异原性抑制作用(antimutagenicity)，发现该作用与绿原酸等抗变异原性成分有关，揭示了杜仲绿原酸对肿瘤预防的重要意义。
(3) 补肾、增强机体免疫作用：实验表明明杜仲绿原酸具有兴奋垂体－肾上腺皮质系统、增强肾上腺皮质功能的作用，说明杜仲绿原酸作为助阳补肾是有科学依据的。研究发现杜仲绿原酸既能启动单核巨噬细胞系统和腹腔巨噬细胞系统的吞噬活性，增强机体的非特异免疫功能，又能对迟发型超敏反应起抑制作用。
(4) 抗氧化、抗衰老、抗肌肉骨骼老化：杜仲绿原酸含有一种可促进人体的皮肤、骨骼、肌肉中胶蛋白的合成与分解的特殊成分，具有促进代谢、防止衰退的功能，可用来预防宇航员因太空失重而引起的骨骼和肌肉衰退，同时发现杜仲绿原酸无论在体内还是体外，均有明显抗自由基作用。
(5) 抗菌、抗病毒：杜仲绿原酸有较强的抗菌消炎作用，桃叶珊瑚苷及其多聚体有明显的抑菌作用，桃叶珊瑚苷元对革兰氏阴性、阳性菌都有抑制作用。桃叶珊瑚苷有抑菌、利尿作用，并能促进伤口愈合；桃叶珊瑚苷与葡萄糖苷一起预培养后还会产生明显的抗病毒作用，但其本身开不具有抗病毒功能。日本爱知医科大学加龄医科学研究所经研究确认，从杜仲中提取的碱性物质有抗破坏人体免疫系统病毒的功能，这种物质有可能用于预防和治疗艾滋病。
(6) 其它作用：利尿，利胆，降血脂，保胎
 

Name: Chlorogenic Acid
Specification: chlorogenic acid from 25%to 98% (HPLC)
Description:  Appearance: gray-white powder
Product Name: Eucommia Leaf P.E
Cas no. 327-97-9
Product Name : Eucommia Leaf Extract
Function:
    a) Can be used as anti-infectious active ingredient
    b) Has wide anti-virus, anti-bacteria effects
   c) Has relatively lower toxicity and side-effects
    d) Has obvious anti-infectious effects, and does not like to lead anti-microbial
        resistance
    e) Due to its obvious anti-infectious effects, it not only can be used in
        pharmaceutical field but also can be used widely in many other fields like food,
        feed additives and cosmetics 
4) Description of chlorogenic acid:
    a) Has a wide range of biological effects, from insect resistance to human health
    b) An important factor in plant metabolism
    c) An antioxidant and has anti-fungi effectivity, stronger than the antibacterial
        effectivity
    d) An ester of caffeic acid and quinic acid, a major phenolic compound in coffee,
        the daily intake of coffee drinkers is 0.05-0.1g
    e) Strong antioxidants in vitro and could therefore be contribute to the prevention
        of disease caused by free radicals